診斷方法:
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一級初步診斷:肉眼觀察軀幹肌肉病變。
二級初步診斷:直接取皮膚、鰓或臟器壓片鏡檢,可見典型橢圓梨形小纖毛蟲,螺旋狀游動,伴隨表皮或內臟病灶的出現即可確診。
三級初步診斷:無
一級確定診斷: 無
二級確定診斷:壓片檢查。
三級確定診斷:18S rDNA設計的 PCR
PCR引子 (針對Tetrahymena corlissi,產物為509 bp)
D-1 5-‘CTAATTGTTGGGCTAATACATG-3'
D-3 5'-GACGAGTCGTTATGAGTCTG-3'
PCR 反應液 25 ul total reaction
1 X PCR buffer (Life Technologies,Basel, Switzerland), 2,5mM MgCl2,
1 uM primers, 200 uM dNTP,
2 U Ampli Taq polymerase (Perkin Elmer, Rotkreuz, Switzerland)
反應條件
40循環 (denaturing: 94°C, 30 seconds;
annealing: 58°C, 30 seconds; extension:
72°C, 90 seconds.) 最後以72°C 延長15 min。
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參考文獻:
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Edward J. Noga 2000. Fish disease—diagnosis and treatment,
Iowa state Press.
Dmitri Pugovkin1, Richard Felleisen2, Thomas Wahli. 2001. A PCR – based method for the detection of Tetrahymena corlissi contaminations in Ichthyophthirius multifiliis in vitro cultures Bull. Eur. Ass. Fish Pathol., 21(6), 222-227
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