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疾病描述：
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1.病原概述
病原型別：細菌
病原環境： 海水
學名：Nocardia crassostreae
病名(及俗名)：
Nocardiosis, Fatal inflammatory bacteraemia (FIB), Focal necrosis, Multiple abscesses, Summer mortality, Pacific oyster nocardiosis (PON).
最早發現者：最早由Friedman等 (1987)分離本菌。
OIE狀況：未表列(Not listed)。
病原摘要：
本菌Nocardia crassostreae會引起太平洋牡蠣 Pacific oysters, Crassostrea gigas局部或全身疾病。本菌為好氣性生長、弱抗酸染色,、產生會分枝的不規則菌絲體； 肽聚醣 (peptidoglycan)含有meso-diaminopimelic acid ，利用arabinose 及 galactose 為主要醣源，46-58個碳原子組成的分枝菌酸、及G+C-rich 的核酸。依據部分165 rRNA gene序列分析，發現應該歸屬在 Nocardia otitidiscaviarum rRNA sub-group 下。本菌的標準株為NB4H (= ATCC 700418)。
人畜共通：非人畜共通傳染病
2.病原分類
病原分類：目前歸屬在放射菌科（actinomycetes），奴卡氏菌屬（Nocardia），豚鼠耳炎奴卡氏菌 Nocardia otitidiscaviarum rRNA sub-group 下。
別名：
命名沿革： 無
3.疾病特性：（感染組織及器官：感染路徑、好發組織器官、宿主）
全身器官均可生長。宿主為正牡蠣Crassostrea gigas 及歐洲牡蠣Ostrea edulis 。
臨床症狀及病理學：
可在感染牡蠣外套膜、鰓、內收肌、心表面看到直徑1 cm大小黃綠色的圓形膿疱。這種病灶也有可能是感染Mikrocytos mackini造成，但是奴卡氏菌造成的病灶較大。
組織病理學檢查
可在病灶處發現革蘭氏染色深染陽性，PAS染色陽性，分枝、顆粒狀嗜鹼性的的菌塊，病灶四周則被緊密聚集血淋細胞環繞。
疾病型態及流行病學：（急性或慢性型態、器官傳播、分佈情形）
全年均可發生感染，但是死亡通常發生在夏末及秋天。主要發生在北美西岸，由英屬哥倫比亞的喬治亞海峽(the Strait of Georgia, British Columbia)到加州。日本(Matsushima Bay , Japan)、荷蘭(Lake Grevelingen, the Netherlands)亦有病例發生。
病原致病性意義：（實際魚場及田間發病、抗藥性等情形）
實際現場死亡率並未詳細調查，在某些地區粗估約35%。Friedman 等. (1999)發現以Nocardia形成的heat shock proteins注射的牡蠣症狀類似實際發病牡蠣。另外發現實際感染Nocardia的牡蠣對熱的耐受性有所降低。
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診斷方法：
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一級初步診斷：臨床症狀觀察到牡蠣外套膜、鰓、內收肌、心臟表面看到直徑1 cm大小黃綠色的圓形膿皰。
二級初步診斷：在BHI培養基3-5 天即可長出分枝為不規則桿狀形態的菌絲體。菌落呈乾燥、臘狀、皺摺，沒有空中菌絲 (aerial hyphae) 出現。
組織壓片檢查
取膿皰處壓片，可見革蘭氏陽性、分枝、顆粒狀嗜鹼性的的細絲狀菌落
組織病理學
可在病灶處發現革蘭氏染色陽性深染，PAS染色陽性，分枝、顆粒狀嗜鹼性的的菌塊，病灶四周則被緊密聚集血淋細胞環繞。
三級初步診斷：無
一級確定診斷：無
二級確定診斷：無
三級確定診斷：PCR
Gee and Elston (1997)發表兩組 PCR引子供診斷用。第一組為利用16S rDNA 設計出能增幅所有的抗酸菌的引子，包含Nocardia。第二組引子則是依據第一組產物序列內設計出對Nocardia屬有特異性的巢內引子。另外由於Nocardia 三層細胞壁的關係，萃取DNA 時必須先以lysozyme處理才能順利萃取 DNA。
PCR引子序列：（增幅部份16S rDNA ）
Forward: 5'-ACG TTG GAG GTT CGT CCT TCA G-3'
Reverse1 5'-TCA CCC CCT TGC TTC TCA TTG T-3'
Reverse2 5'-CCA GTC ATC ACC TTT TCT GTG GTC-3' The forward及 reverse 引子1增幅出 441 bp 片段， forwardand reverse 引子 2 增幅出 660 bp片段。
50 µl PCR反應液：10 mM Tris-HCl (pH 8.3), 50mM KCl, 1.5 mM MgCl, 200 mM deoxynucleotides, 0.5 mM 的前後引子, , 0.03 to 0.3 µg of template DNA。
PCR反應條件：先加熱上述反應液1分，再加入1.25 U Amplitaq DNA polymerase (Roche)，然後進行35循環的增幅（30 s at 94°C, 30 s at 58°C and 1 min at 72°C）最後進行l 5 min at 72°C 的延長。產物定序及基因庫比對。
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參考文獻：
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Elston, R.A., J.H. Beattie, C. Friedman, R. Hedrick and M.L. Kent. 1987. Pathology and significance of fatal inflammatory bacteraemia in the Pacific oyster, Crassostrea gigas. Journal of Fish Diseases 10: 121-132.
Engelsma MY, Roozenburg I, Joly JP. 2008. First isolation of Nocardia crassostreae from Pacific oyster Crassostrea gigas in Europe. Dis Aquat Organ.
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Friedman, C.S., H. Beattie, R. Elston and R.P. Hedrick. 1987. Isolation of the bacterium causing focal necrosis (fatal inflammatory bacteremia) in Pacific oysters (Crassostrea gigas). American Fisheries Society Fish Health Section Newsletter 15(1): 3.
Friedman, C.S., J.H. Beattie, R.A. Elston and R.P. Hedrick. 1991. Investigation of the relationship between the presence of a Gram-positive bacterial infection and summer mortality of the Pacific oyster, Crassostrea gigas Thunberg. Aquaculture 94: 1-15.
Friedman, C.S., B.L. Beaman, J. Chun, M. Goodfellow, A. Gee and R.P. Hedrick. 1998. Nocardia crassostreae sp.nov., the causal agent of nocardiosis in Pacific oysters. International Journal of Systematic Bacteriology 48: 237-246.
Friedman, C.S., G.N. Cherr, J.S. Clegg, A.H. Hamdoun, J.L. Jacobsen, S.A. Jackson and K.R. Uhlinger. 1999. Investigation of the stress response, summer mortality and disease resistance of oysters, Crassostrea spp. Journal of Shellfish Research 18: 297. (Abstract).
Gee, A. and R.A. Elston. 1997. PCR detection of the bacterial pathogen in oyster nocardiosis. Journal of Shellfish Research 16: 264. (Abstract).
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