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魚類球蟲症
疾病代碼: DIS00219
作 者: 黃旭田
中文病名: 魚類球蟲症
英文病名: Piscine Coccidiosis
疾病描述: 病原型別:原虫(Protozoa)
病原環境:海水、半淡水鹼水及淡水(marine, brackish & fresh water)
學名:有多種球虫種類,目前文獻記載計有Cryptosporidium spp., Isospora spp., Octosporella spp., Calyptospora spp., Goussia spp., Crystallospora spp., Epieimeria spp., Eimeria spp., 計8種虫體,其中以艾美球虫(Eimeria spp.)感染種類最多,依Duszynski et al., 2000報告,超過1300種艾美球虫,被感染約有500種變溫動物(包括魚類、爬虫類及兩棲類)。
病名(及俗名):魚類球虫症(Coccidiosis of fish、piscine coccidiosis)
最早發現者:Eimeria Schneider,(1875);Goussia Labbe,(1896);Octosporella Ray & Raghavachari,(1942);Calyptospora Overstreet et al.,(1984);Epieimeria Dykova & Lom,(1981);Isospora, Schneider,(1881);Crystallospora Labbe,(1899);Cryptosporidium Tyzzen,(1907)
OIE狀況:未表列(Not Listed)
病原摘要:
依孢母細胞(Sporocyst)之形態,由Lom(1984)及Overstreet et al(1984)重新分類,從艾美科(Eimeriidae)中分出五個屬,其中Eimeria及Epieimeria之孢母細胞呈卵圓形(egg-shaped),其內的子孢子(Sporozoite)經由極核離開,Goussia之子孢子含有二個殼片,經殼片而釋放子孢子,Crystallospora之孢母細胞呈結晶狀(crystal-shaped),而Calyptospora的子孢子呈扭結樣向外生長,稱為孢足(sporopodia)。其詳細分類狀況,如下陳述:
寄生魚類球虫分類概況分析表
感染魚類之球虫,除了排除細胞內組織寄生外,主要為艾美科(Eimeriidae)球虫,寄生於宿主組織細胞內之嗜寄生虫性空泡中(Parasitophorous vacuole, PV);其生活史由無性生殖(即裂殖生殖期, merogony)及有性生殖(包括配子生殖期,gamogony;與孢母生殖期,sporogong),而孢子生殖其為虫體感染宿主之首要關鑑為芽孢化卵囊(sporolated oocyst)內含孢母細胞(sporocyst)及子孢子(sporogoite);而卵囊內孢母細胞及子孢子數目為區別屬與種的主要形態學方法;下依據Dy kova及Lom,1981分類如下:
 1.
(a)卵囊內今有4個裸露之子孢子(sporozoite),無孢母細胞(sporocyst),發展成寄生宿主細胞膜下之虫體……………………隱孢子虫屬(Cryptosporidium)
(b)卵囊內含2個孢母細胞(sporocgsts)(2個孢母細胞,每個孢母細胞內含4個子孢子)………Isospora屬
(c)卵囊內含4個孢母細胞(sporocgsts)…………………………………………3
(d)卵囊內含8個孢母細胞(sporocgsts)(卵囊內含8個孢母細胞,每個孢母細胞內含2個子孢子)………Octosporella屬
2.
(a)卵囊表面含1至2或多個長結一延長之投射物(long knob-bearing projections)(卵囊內含4個孢母細胞,每個孢母細胞含2個子孢子,孢母細胞具有1至多個投射物稱為sporopodia)………………………Calyptospora
(b)孢母細胞不含投射物(projections)……………………………………………3
3.
(a)孢母細胞含單極展生之特殊構造(stieda body),呈點狀(pointed)、環狀(collar)或長結狀(knob-like)…………………………………………………………4
(b)孢母細胞不含stieda body,但俱有沿著縱縫合線(有時在光學顯微鏡下不易觀察)2瓣組成之孢壁……………………………………………………Goussia屬
(c)孢母細胞呈結晶狀(sporocyst crystal-like),沿著橫縫合線(transverse suture line)由2個六角形瓣組成孢壁…………………………………Crystallspora屬
4.
(a)裂子生殖期(merogong)及配子生殖期(gamogony)均在宿主細胞膜下,而孢母生殖期(sporogong)寄生於細胞內…………………………Epieimeria屬
(b)規則性寄生於細胞內生殖,或無:如上述各種虫體特徵…………Eimeria屬(每個卵囊內含4個孢母細胞,每個孢母細胞內含2個子孢子)
這8種球虫分屬4科球虫類,分別為蓋球虫科(Calyptosporidae)、隱孢子虫科(Cryptospo ridiidae)、艾美球虫科(Eimeriidae)及Barrouxidae科(依Levine, 1988及Upton, 2001);而輻鰭魚亞目魚類(Actinopterygii)被蓋球虫科、隱孢子虫科及艾美科球虫科感染,其中含8屬球虫;Calyptospora、Cryptosporidium、Crystallospora、Eimeria、Epieimeria、Goussia、Isospora及Octosporella屬,其中以鯉形目(Cypriniformes)魚類感染5種球虫,Calyptospora、Eimeria、Goussia、Isospora及Octosporella為感染球虫種類及目數最多之魚種。
人畜共通:目前只有Cryptosporidium parvum感染人類之報導。
2.病原分類
原生動物界(Protozoa Goldfuss, 1818)、粘孢子門(Myzozoa, Cavalier-Smith & Chao, 2004)、頂生孢子亞門(Apicomplexa)、圓錐狀綱(Conoidasida, Levine, 1988)、真球蟲目(Eucoccidiorida, Leger & Duboscq, 1910)、艾美球蟲亞目(Eimerioriorina, Leger, 1911)、隱孢子球虫科(Cryprosporidiidae)、隱孢子虫屬(Cryptosporidium, Tyzzer, 1901);艾美球虫科(Eimeriidae, Minchin, 1903)、Isospra屬Schneider, 1881;艾美球虫屬(Eimeria, Schneider, 1875);Octosporella屬Ray & Raghavachari, 1942, Epieimeria屬,Dykova & Lom, 1981, Crystallospora屬 Labbe, 1899;蓋球虫科(Calyptosporidae)之蓋球虫屬Calyptospora屬,Overstreet et al, 1984;巴羅球虫科(Barrouxiidae)之Goussia屬,Labbe, 1896。
命名沿革:
球虫之分類依虫體型態特徵、生殖方式、寄生方式各專家學者均有不同分類方法,可參考Tenter et al., 2002, International Journal for Parasitology 32:595-616.
疾病特性
艾美球蟲(Eimeria spp.)主要特徵為卵囊內含有四個孢母細胞(sporocyst),每個孢母細胞含有二個子孢子(sporozoite), Isospora spp. 則卵囊內含有2個孢母細胞,每個胞母細胞含有4個子孢子;Octosporela spp.其卵囊內含有8個孢母細胞,每個孢母細胞內含有2個子孢子;Calyptospora spp.卵囊內含有4個胞母細胞,每個孢母細胞內含有2個子孢子,孢母細胞具有1至多個投射物,稱為孢足(sporopadia),球蟲可感染海水、半淡鹼水及淡水養殖或野生魚類,其中艾美球蟲(Eimeria spp.)大約感染500種以上之變溫動物宿主(poikilotherm hosts)。其卵囊(Oocyst)呈球形或橢圓形,外有一層堅硬的被膜;內的孢母細胞具有透明的胞子膜、膜內包裏著相互顛倒不等形狀彎曲的子孢子,而每個生頂芽胞有一個核,兩個孢母細胞間尚有一個孢子殘餘體(spore residual body),卵囊內仍有卵囊殘餘體(Oocystic residual body)和1~2個極體(polar body);同時卵囊上有1個小孔,稱卵孔(microphyle)、卵孔上有一個蓋,稱為極帽(polar cap)或卵蓋,通常不易觀察到,其孢化卵囊見圖1。
當卵囊隨宿主糞便排出體外,被魚體吃食並呈芽胞化的卵囊後,進入腸道,即被感染;極帽被膽汁或其他物質消化溶解而釋出子孢子,侵入宿主腸道粘膜上皮或膽管上皮或隨血流入侵其他臟器,在宿主細胞內發育為裂殖體(schizont),其蟲體的生活史,見圖2,因此,艾美球蟲的發育周期,包括裂殖生殖(merogong)、配子生殖(gamogony)及孢子生殖(sporogony)三階段,各階段的發生部位有些差異;並且各種艾美球蟲寄生的部位亦有不同,見表1。
表1.各種艾美球蟲寄生於不同品種魚類之分佈狀況
歐鮊艾美蟲(E. alburni)︰囊孢在19至21微米間,孢子長13微米,6微米。寄生於歐鮊、赤睛魚及粗鱗鯿等魚類腸管及周圍的脂肪組織中。
鰻艾美蟲(E. anguillae)︰囊孢約10微米,孢子長8微米,5微米。寄生於歐洲鰻的腸上皮組織內。
杜父艾美蟲(E. cotti)︰寄主為杜父魚,囊孢10至11微米,孢子之長為7至8微米,為5.1微米。
鯉艾美蟲(E. cyprini)︰寄生於稚鯉之腸上皮細胞內而引起嚴重之發炎現象。對患魚的腹部施以輕壓,會有樣的液體自肛門流出。病魚之形體消瘦,眼球凹陷,此為一般的外觀症狀,其腸道之粘液中雜有8至14微米大的卵囊,每一個卵囊中有四個孢母細胞,而每一個孢母細胞內則各有兩個子孢子。
棘魚艾美蟲(E. gasterostei)︰侵犯棘魚的肝臟,囊孢大小在16至18微米之間。其孢子呈紡鍾形,長10微米,4至6微米。
丁鱥艾美蟲(E. minta)︰寄生於丁鱥的臟、肝臟脾臟。囊孢球型,具有膜。孢子則為紡鍾形,6~7微米,長15微米。本種無休眠體。
鱸艾美蟲(E. percae)︰孢子大小約為8微米。寄生於鱸魚上皮細胞及粘膜下層。
赤睛魚艾美蟲(E. pigra)︰囊孢大小在17至19微米之間;孢子之長軸為15微米,短軸為5微米。與他種球蟲類不同的是,本種並不在細胞內出現。
皮下艾美蟲(E. subepithelialis)︰侵犯鯉魚腸管的中段及末端,而在患部形成2亳米大的結節。主要的外觀症狀與前述之鯉艾美蟲所引起者相同。
鱒艾美蟲(E. truttae)︰囊孢12微米大;孢子則為8×4.2微米。寄生於鱒魚小腸的上皮細胞及幽門垂內。
懷氏艾美蟲(E. wierzejskii)︰寄生於鯉魚腸管內,其囊孢大小在11至12微米之間,孢子則為8.5×4.1微米。
本蟲體含有複雜之conoid apical構造,能夠進入宿主細胞內寄生;在全部生活史中,幾乎營細胞內寄生;感染之蟲體稱為子孢子(sporozoite);在宿主細胞內發展為裂殖體(merogont),且釋出多數的裂殖孢子(merozoites),靠這種無性生殖來達到蟲體的生長與增殖,整個階段稱為裂體生殖(merogony),然後裂殖子再經數次分裂區分為多數雌性配子(macrogametes)與雄性配子(microgametes),雌性配子與雄性配子交合形成接合子(zygote),這種過程稱為配子生殖(gamogony),而接合子再發展為卵囊(Oocyst),每卵囊內含有四個孢母細胞(sporocyst),每個孢母細胞內含有二個子孢子(sporozoite),這種過程稱為胞母生殖(sporogony);寄生於魚類之此蟲體屬真球蟲目(Eucoccidiida)內多數類屬於艾美球蟲(eimeriid coccidians)。
疾病型態及流行病學
大多數重要寄生魚體之球蟲類蟲體,均寄生於組織器官,這8種球蟲分屬四科,有些僅寄生於腸道,其他球蟲則寄生於腸道及非腸道組織(包括肝、泳鰾、脾、胰等臟器),而某些球蟲僅寄生非腸道組織。
一、目前記載超過1,300種艾美球蟲(Eimeria spp.),其寄生宿主模式可區分如下︰
1)寄生腸道型(以某些球蟲為例)
Goussia subepithelialis寄生於鯉魚(common carp)及金魚(gold fish),寄生在腸道而粘膜下層,促成上皮增生,形成結節性病變,稱為結節性球蟲病(nodular coccidiosis);一般寄生腸道球蟲發展增殖快速,如Eimeria vanasi在24~27℃下從感染至芽孢化(sporulation)僅需8天;而寄生上皮增殖經數次無性生殖期(為裂子生殖狀態,merogonous),再轉為有性生殖之配母生殖狀態(gamogonous),形成配子母細胞(gamont),然後分化為microgamont至microgamete及macrogamont至macrogamete,再交配成接合子細胞(zygote)轉化為卵囊(Oocyst),大部份隨糞便排出的卵囊在腸道已經芽孢化(sporulation),因此排出後囊內即具有孢母細胞(sporocyst),具感染能力,此階段為孢母生殖狀態(sporogonous)。
G. carpelli寄生於歐美養殖之鯉科魚類(cyprinids),特別是鯉魚(common carp)及鯽魚(crucian carp),在過氣候條件及長途運輸等緊迫因子下,造成寄生的腸道組織壞死潰瘍及瀰浸出血性腸炎‧常造成幼魚鉅大的死亡。而在東亞養殖之草食性鯉科魚類,亦有被G. cheni及G. mylopharyngodoni感染,產生相似之病例報告(Noga, 1996)。
Eimeria vanasi寄生宿主腸道上皮細胞,可分為細胞質邊寄生(epicytoplasmic)及細胞質內寄生(intracytolpasmic)之內源生增殖世代(endogenous generations)兩種特性在,包括裂殖生殖(merogonous)及配母生殖(gamcgonous)兩種狀態;在蟲體寄生增殖過程中,可由腸道上皮細胞內移殖至細胞質旁;多種魚類球蟲(Eimeria spp.及Goussia spp.)在宿主腸管上皮細胞之細胞核內增殖如E. vanasi以裂殖生殖及配子母細胞(gamonts)兩種型態寄生於細胞核內,並同時呈現於細胞質邊及細胞質內。
而基於蟲體細胞質邊(epicytoplasmic)之寄生特性,Dykova & Lom(1981)特別從艾美科球蟲重新規劃呈新的一屬,稱為Epieimeria;目前有E. anguillae(寄生於鰻魚)、E. isabellae(寄生於conger eel)。
2)寄生腸道及非腸道型
主要發生於美國大西洋海岸及墨西哥灣之Topminnow(Fundulus grandis)及Silverside(Richardsonia sp.)兩種魚類之內臟器官(肝)及皮膚,此球蟲為Calyptospora funduli;嚴重感染時,此蟲體卵囊寄生肝臟,造成肝臟呈現蒼白或黑色病變,同時亦可寄生於胰臟脂肪組織卵巢膽囊皮膚及腸系膜等臟器。
3)寄生非腸道型
發生於養殖歐亞之泥鰍(roach),寄生於臟之Eimeria rutilli,造成小管壞死。寄生於泳鰾之G. cichlidarum屬於內源性擴展增殖,在23~26℃下至少58天發展為孢母細胞狀態。
感染不同魚種之球蟲類,似乎有地理區域性之限制,Eimeria vanasiGoussia cichlidarum被報告發生於以色列、南非、烏干達養殖之慈鯛科魚類;而E. vanasi亦報導感染泰國養殖之尼羅河吳郭魚Oreochromis niloticus);以色列養殖之鯉魚金魚,被Goussia carpelli感染。而南美地區則報導Calyptospora spp.感染肝及生殖腺;歐亞地區飼養之鯉魚則有感染Goussia subepithelialisEimeria sinensis感染記載;銀鯉(silver carp)與大頭鏈(bighead)在中國大陸,寄生於淡水魚類之艾美球蟲約有30種,其中如青魚艾美球蟲(E. mylopharyngodoni)、住腸艾美球蟲(E. cheni)、廣東艾美球蟲(E. kwangtunhensis)均屬Dykova及Low所稱的第一種類型(蟲體發育3個階段均在細胞質內運行)。
Dykova及Low(1981)依據魚類艾美球蟲各發育階段與感染宿主之關係,分為7種類型︰
1.M(Merogony)、G(Gamogony)及S(Sporogony)均發生於同一宿主器官之上皮細胞、細胞質中(許多種類)。
2.M、G及S發生感染宿主細胞之細胞核內(如︰Eimeria quentini)。
3.M及G發生在感染宿主細胞之細胞質中,而S期部份為內源性、部份為外源性,增殖的卵囊排出時未芽孢化(unsporulated)(如︰E. etheostomae)。
4.如3,但所有卵囊排出時,均未芽孢化。(如E. dogieliE. aurati
5.M及G發生在感染宿主細胞之細胞質中,S期在分化完整之器官形內源性增殖發展(如︰E. branchiphila, E. brevoortiann),而蟲體移行程序,由腸道至精巢並未明確,即這階段為動態狀況(配母細胞,gametes?或接合子,zygotes)。
6.M及G發生在宿主細胞上皮微絨毛上,即內漿外,當呈S期(孢母生殖期,sporogony)時則降至細胞質邊(如︰Epieimeria anguillae, G. cichlidarum)。
7.M及G發生在宿主細胞腸管上皮微絨毛上,而S期為外源性增殖發展(如︰Goussia pigra)。
本病的傳播路徑在許多腸型魚類球蟲之致病機序,主要是魚體吃食排出體外芽孢化的卵囊感染,而有些魚類球蟲則需經過中間宿主之媒介始能完成感染過程,如G. carpelli,需由多毛類(tubificid oligochaetes)中Tubifex屬或Limnodrilus吃食子孢子(sporozoite),再經魚類吞食此多毛類(如紅蚯蚓、紅蟲)而感染。在魚類球蟲中,Calyptospora spp.屬於寄生於宿主肝、生殖腺腸管脂肪組織;但需經中間宿主為媒介,一種蝦類Palaemonetes pugio吞食芽孢化卵囊,子孢子從卵囊釋出於蝦體腸道中,再經鱂科魚類(Killifish)吃食此蝦體,而感染寄生於肝臟
在所有年幼魚體(體長25~50mm),一般被魚類球蟲感染,特別是艾美球蟲幾乎在同一宿主細胞內完成細胞質內(intracytoplasmic)、細胞質邊(epicytoplasmic)及細胞核內(intranuclear)三種型式的感染進展,尤其在低水溫狀態下(<13℃)或其他緊迫因子有在下則再發生性感染狀態,對於這種疾病的發展,有人推測可能在裂殖階段(merogonic stages)時蟲體呈現不活化狀態而伴隨魚體成長,在某些條件下被活化,再伴隨宿主生殖循環感染。
寄生於泳鰾之球蟲,似乎僅記載於Oreochromis spp.及Sarotherodon galilaeus,因為長期內源性寄生,感染之發生率呈現寬廣之年齡及魚體大小之區別。
二、隱孢子蟲感染症(Cryptosporidiosis)
隱孢子蟲(Cryptosporidium)屬於真球蟲目、艾美球蟲亞目,隱孢子蟲科(Cryptosporidiidae),目前文獻上記載的有Cryptosporidium molnari卵囊大小4.72×4.47μm,呈圓球狀;感染海鯛(gilthead sea bream, Sparus aurata L.)、歐洲海鱸(European sea bass, Dicentrarchus labrax L.)於部組織上皮細胞及Cryptosporidium scophthalmi n. sp.卵囊大小,3.91×4.44μmu,幾乎呈圓球狀;感染養殖之turbot(Scophthalmus maximus)於腸道上皮細胞,很少寄生於組織,主要侵害4-100g體重之魚體。
隱孢子蟲卵囊內含有裸露的4個子孢子(Sporozoite)及殘留體;其裂殖體(meront)及配子體(gamont)很微小約5×3μm,位於上皮細胞刷狀緣頂部(brush border apices)呈現球狀緻密性橢圓體或蕈狀(mushroom-like)構造;宿主與蟲體間的微絨毛在其他脊椎動物之隱孢子蟲完全缺乏;卵囊之芽孢化為內源性狀態,全部芽孢化卵囊發現於腸或上皮細胞;裂殖及配子生殖狀態(merogonial and gamogonial stages)均屬於典型的細胞質外增殖,而孢母生殖狀態(Sporogonial stages)則於細胞質內。
臨床症狀及病理學
一、魚類球蟲
魚類球蟲症一般呈現慢性感染及死亡率逐漸增高,在養殖場中則表現一定之死亡率;鯉科及慈鯛科大都為腸道型球蟲感染,如G. carpelli感染8月齡金魚,而死亡率發生於感染後30~45天後。體長20至50mm之幼鯉魚(carp fingerlings、或幼慈鯉科魚)被球蟲感染後,均呈現最重體形消瘦,而耐過的魚體可自然復原;在非洲養殖之金魚鯉魚及慈鯛科魚類在魚齡少於2月齡下,很少有球蟲感染之報告。
寄生於腸管之球蟲,對魚體的傷害在於腸道上皮細胞之損傷,如E. vanasi感染鯛科幼魚,因為蟲體屬細胞質內寄生,造成對腸管粘膜上皮的破壞,而細胞質邊之寄生感染(epicytoplasmic infection)對腸管粘膜上皮的傷害似乎較輕微;腸道型球蟲寄生腸道上皮細胞所造成的炎症反應僅於粘膜層及壞死細胞碎屑的堆積;但結節型球蟲症(nodular coccidiosis),如G. subepithelialis感染鯉魚,因卵囊積於粘膜固有層,誘導白血球浸潤之腸炎反應;亦者G. cichlidarum呈現細胞質邊之感染,導致鯛科魚類之泳鰾上皮線隙細胞之脫屑損傷變性;由於腸管及泳鰾粘膜上皮細胞的增生,使得寄生於細胞內之卵囊無法排出於腸腔內,持續的刺激及上皮增生,遂形成結節病灶,造成所謂的節結形球蟲症。腸道寄生性球蟲,對發病魚體腸壁粘膜層、漿膜層產生病變,尤其以粘膜固有層病灶更為嚴重,腸壁發炎充血,形成潰瘍甚至穿孔。或如E. mylopharyngodoni或E. cheni,則瓣呈現蒼白、腹部膨大;腸道前段之腸壁上可見多數白色結節、有些患魚明顯突出,有些則不甚明顯;而腸管正常腫脹2~3倍;嚴重病例,甚可見腸壁潰瘍穿孔,腸漿膜面亦可見白色結節;患魚顯現體色變黑、食慾廢絕、行動遲緩漸漸死亡;Fernando氏(1982)認為寄生腸道的種類,其危害性較寄生於實質組織器官(如肝、)為小,而寄生上皮細胞的艾美球蟲其危害性比寄生腸道粘膜固有層組織所造成的傷害為小。
二、隱孢子蟲
魚類感染隱孢子蟲所呈現之臨危症狀,通常不明顯,但對魚體生長狀況會有所影響;而在嚴重感染下,對於上皮細胞破壞程度遠於其他類似原蟲,當魚體被Cryptosporidium scophthalmi感染時會形成絨毛萎縮融合,腸細胞變性、脫屑、絨毛縮短及炎症細胞浸潤;同時會顯現多數的rodlet cells。
病原致病性意義
頂生孢子門對動物感染,造成農畜業的傷害,粗估每年約十億美元;而魚類球蟲品種繁多約有250種球蟲感染魚類,且感染甚多魚種;而單一魚種可被多種球蟲感染,如西鮊屬魚類Alburnus alburnus)記載感染5種球蟲,擬鯉屬魚類Rutilus rutilus)感染8種球蟲鯽魚Carassins auratus)感染10種球蟲;在感染魚類8種球蟲屬中,文獻記載5種Calyptospora屬、1種Crystallospra屬、5種Epieimeria屬、69種Goussia只感染魚類;而其他球蟲不但感染魚類,尚還感染鳥類、兩棲類爬蟲類、哺乳動物、如艾美球蟲(Eimeria)之宿主域最為廣泛,且種類最繁重,單感染魚類就有157種。Isospora球蟲,除感染魚類外,還感染兩棲、爬蟲、哺乳動物及鳥類,目前記載約360品種。而6種Octosporella球蟲內,有3種感染魚類,如O. opeongoensis、O. sasajewunensis、O. notropis
大多數魚類球蟲,主要侵犯消化道,但是亦可在其他臟器增殖擴展,所侵害寄生之器官有肝臟實質組織,胰、、脾、脂肪組織、泳鰾、膽囊漿膜生殖腺,如E. brevoortiana其裂殖生殖期(merogony)及配母生殖期(gamogony)發生在幽門盲囊之上皮組織,而孢母生殖期(sporogony)僅出現在精巢。所以魚類球蟲相群之定性分析顯示出大量的分類叢量,近年來應用分子生物學技術如AFLP(Amplified fragment length polymorphism)、monolocus PCR. 5S及18S rDNA或ITS-1(Internal transcribed spacer-1)、ITS-2、PCR-based capillary electrophoresis廣泛應用於頂生孢子門的分類,相信將來會有更多的數據及應用了解蟲體的特性、來達到防治的效果。
診斷方法: 一級初步診斷:
採取患魚前腸腸壁上的少許粘液,或採自腸壁上白色結節病灶處組織或剪取一小塊發生病變的組織,直接放於載玻片上,加上少許生理鹽水;並進行壓成片鏡檢。
二級初步診斷:
經鏡檢後,將疑似球蟲的卵及括取發病魚體腸道上皮,在2.5%重鉻酸鉀下培養觀察其卵囊發育狀況,觀察卵囊內之孢母細胞(sporocyst)及子孢子(sporozoite)之含量數目為分類依據。
三級初步診斷:目前尚無可應用的方法。
一級確定診斷︰
除了上述壓片檢查及臨床症狀觀察外,配合卵囊培養鑑定,加上組織症理學鏡檢;可從腸道上皮細胞內觀察出卵囊,雌及雄性配子細胞,並鏡檢腸道上皮受損狀況,可確定屬蟲體感染。
二級確定診斷︰
目前均採用電子顯微鏡(包括穿透式及掃描式),觀察蟲體超顯微結構,並判定是屬細胞質邊、細胞質內或細胞核內寄生,且觀察裂子生殖,配細胞生殖及孢母細胞生殖狀態是否同在一宿主細胞內發生;可參閱Disease of Aquatic Organisms, 1995, 22(1)︰67-76有詳細的報導。
三級確定診斷︰
可應用目前分子生物學診斷技術如SSU rRNA,進行寄生蟲體的品種的確立;可參閱International Journal of Parsitology,2009,39︰175-189及2004,34︰501-514。
治療方法: 目前本病尚無有效的治療方法、又則政府目前出版的水產動物用藥使用規範裏並無治療球蟲的推荐用藥;故業者如確定養殖魚群被球蟲感染,需採用何種措施,端視業者對處理本病的態度而定。
預防控制方法: 1.除了嚴格採取防疫措施外,需視從採購魚苗場的疫情狀況,並隔離飼養一段時間,不要冒然混入同種不同齡之魚群內,以減少發生疫病之機率。
2.清除魚池中過量底泥,用生石灰或漂白粉徹底清池消毒,殺滅池底孢子,並同時曬池、翻土,可預防球蟲病。
3.採用輪養不同魚種之程序,有一定的預防作用。
相關圖片:
芽孢化卵囊 圖片參考來源:http://www.saxonet.de/coccidian/oocyst.htm
圖1.a&c 芽孢化卵囊、b&d 孢母細胞( sporocyst) 圖片參考來源: http://biology.unm.edu/ biology/
圖片參考來源:http://www.saxonet.de/coccidian/oocyst.htm
圖2. 艾美球蟲生活史
Goussia spp.
Systematic Parasitilogy, 2003, 55:11-18.
Oocysts of Cryptosporidium parvum stained by the acid-fast method. ( Avianbiotech.com )
Diagrammatic illustration of the oöcyst and sporocysts of Goussia vanasi (Landsberg et Paperna, 1987): a. sporulated oöcyst; b. sporocyst after 24 h sporulation; c. sporocyst after 48 h sporulation. Scale-bar: 5 μm. Systematic Parasitilogy ,59:75-80 ,2004.
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