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牡蠣波納米亞蟲病
疾病代碼: DIS00150
建立日期: 2009/02/12
更新日期: 2009/05/07
作 者: 黃旭田
中文病名: 牡蠣波納米亞蟲病
英文病名: Infection with Bonamia ostreae
疾病描述: 1.病原:
病原型別:原蟲(protozoa)
病原環境:海水(marine)
學名:Bonamia ostreae
病名(及俗名):微小細胞病(Microcell disease),牡蠣血淋巴球病(Haemocyte disease of flat oyster)
最早發現者:Pichot et al. (1979) (R)
OIE狀況:表列(Listed)
病原摘要:本病原寄生於血淋球(haemocyte)內,蟲體直徑平均2至3μm;蟲體細胞質可區分成兩種不同型態,細肫質高嗜鹼性之蟲體呈圓形,直徑2至3μm,細胞核周圍有一圈蒼白暈,而細胞質低嗜鹼性之蟲體,形體較大,直徑達3至5μm。蟲體對過醋酸(peracetic acid)0.001~0.005%有感受性。
人畜共通:No
2.病原分類:
Cercozoa門、Endomyxa亞門、Ascetosporea綱、Haplosporida目、Haplosporidiidae科、Bonamia屬(Cavalier-Smith, 2003) (R)
命名沿革:Bonamia ostreae, Bachere et al. 1982(R)
疾病特性:
一般被牡蠣波納米亞蟲(B.ostreae)感染的歐洲牡蠣,並不顯現臨床症狀,當蟲體增殖到一定的數量,則會產生血淋球浸潤及發生滲漏(diapedesis)現象;當被蟲體寄生的血淋球爆裂後,釋出蟲體至血淋巴液(haemolymph)間,而游離血淋巴液間的蟲體再入侵血淋球,如此循環感染。嚴重感染的牡蠣則呈現生長不良、閉合不全,一般呈現臨床症狀之個體大都集中於二年生之牡蠣,而0到1年生牡蠣其感染發病,需經六個月的潛伏,在蟲體寄生數目達一定量始能發病。
疾病型態及流行病學:
本病主要感染二年生之歐洲牡蠣(European oyster, Ostrea eduils),其他尚可侵害奧林匹亞牡蠣(Olympia oyster, O.lurida=O.conchaphila)、南方泥牡礪(South mud oyster, O.angasi)、紐西蘭牡蠣(New Zealand oyster, Ostrea luaria=Tiostrea lutaria)、南美洲牡蠣(South American oyster, O.chilensis=Tiostrea chilensis)、阿根廷牡礪(Argentian flat oyster, O.puelchana)等,如果移植至感染域亦可被本病原感染發病;但歐洲蛤(European clam, Ruditapes decussatus)、菲律賓蛤子(Manila clam, Ruditapes phillippinarum)、貽貝類:Mytilus edulisM.galloprovincialis、太平洋牡蠣(Pacific oyster, Crassostrea gigas )則對本病原有抵抗性。本病發生於歐洲大西洋整個沿岸水域養殖貝類國家,法國、西班牙、荷蘭、義大利、愛爾蘭、英國(不包括蘇格蘭)、丹麥、美國(加州、緬因州、華聖頓州)、加拿大。本病受到環境因素的影響,如水溫在12至20℃之間,則會促進蟲體增殖,產生病害。更因蟲體寄生於血淋球內,造成系統性感染,牡蠣為抵抗病原而用盡能量,最後個體由於饑餓及衰竭而死亡。
雖然對於本病原在牡蠣體外的生活史至目前仍未明瞭;但可經水平同居感染由發病牡蠣感染鄰近健康牡礪,或經由純化分離的蟲體,可成立接種感染。在本病原發展增殖期及殘存於流行區域前,很難檢查出本病原;而呈現臨床症狀之牡蠣養殖區其發病週期可達3至5個月,尤其在北半球溫暖季節9至10月,及南半球1至4月裏死亡率可達到最高峰。
臨床症狀及病理學:
在發病死亡牡蠣組織上,可見黃色斑狀病牡,而嚴重病例於鰓、外套膜及消化腺結締組織產生穿孔性潰瘍,這些病灶並非專一性的病變,其他種類波納米亞蟲之感染,亦有類似病牡發生。
在組織病理切片下,早期感染於血淋球內可見牡蠣波納米亞蟲(直徑2至3μm),並伴隨於腸道、胃之血竇及鰓、外套膜結締組織可見緻密局部血淋球浸潤,而嚴重病例則造成全身性感染。
疾病致病性意義:
本病原之細胞膜上有醣苷殘基可與顆粒性血淋球(granulocyte)上之lectin行醣基化接合(glycosylation),並經吞噬作用進入血淋球內,而牡蠣波納米亞蟲能抑制顆粒性血淋球內之氧爆作用(respiratory burst),再者血淋球內之吞噬體(phagosome)釋出脂質使吞噬體膜內嵌擴大形成嗜寄生性空泡(parasitophorous vacuole, PV),經過修飾的吞噬體膜無法與溶素體(lysosome)結合形成吞噬溶素體(phagolysosome);因此,顆粒性血淋球內溶素體所分泌的酵素則無法進入嗜寄生性空泡內,殺死蟲體;這種病原逃避被破壞的方式,使得波納米亞蟲得予生存、增殖,如果宿主免疫抵抗力旺盛,則可壓抑蟲體增殖,但環境誘因、包括水溫、鹽度、撈捕次數、餌料餵食及水中化學污染物(PCBs.重金屬等)使宿主免疫力下降,並增加蟲體藉此繁殖且破壞牡礪組織,進而造成牡蠣死亡。
診斷方法: 一級初步診斷:
採取發病或瀕死牡蠣之鰓及心臟(最好能找出心室位置)行抹片染色鏡檢,於鏡下可見到球形或卵圓形蟲體(2至5μm),其細胞質呈嗜鹼性、細胞核呈嗜伊紅性(顏色依使用的染色液而有不同變化),在血淋球內外均檢出牡礪波納米亞蟲,有時可見多核的蟲體。用這個方法觀察的病原體比用組織病理學染色後觀察的蟲體要大些,如果貝殼類受到感染,其感染組織多發生於上皮,所以用心臟行塗抹片並不適用於檢查感染的牡礪。
二級初步診斷:尚無應用方法。
三級初步診斷:尚無應用方法。
一級確定診斷:
主要於發病死亡牡蠣組織上,可見黃色斑狀病灶;嚴重病例則於鰓、外套膜及消化腺結締組織產生穿孔性潰瘍病變。
二級確定診斷:目前尚無特異性血清型之分類報導。
三級確定診斷:
近年均採用聚合酶鏈鎖反應(polymerase chain reaction, PCR)及原位雜交法(in situ hybridization, ISH),可確定蟲體的感染,如再加上限制酶切割由蟲體萃取的DNA序列,行RFLP(restriction fragment length polymorphism)─PCR分析,更可確定波納米亞蟲感染牡蠣的蟲體種類。而在電子顯微鏡下,可觀察蟲體的單孢子體(haplosporosomes)和大球體的數量,粒線體的形態,細胞核與細胞質的比例來區別本蟲體與其他波納米亞蟲(Bonamia spp.)。一般在鏡下,可見單核、二核及多核質團(plasmodial stage)之蟲體;而細胞內構造包括粒線體、單孢子體、高爾基體(Golgi apparatus)及持續性核內微小管(microtubules)構造。如採用核酸探針、PCR、原位雜交及DNA定序等實驗操作方法確立病原,可參考世界動物衛生組織水生動物診斷手冊(Manual of diagnostic of aquatic animals, 2006)內之記載,依序實施操作鑑定。
治療方法: 目前尚無有效的治療方法可用。
預防控制方法: 可藉育種方式改良品種,育成對本病有抵抗性的特有牡蠣,同時禁止發病區的群體牡礪移動;不要購買有發病記錄的牡蠣場,當為種苗的來源,減少飼養密度,如果可能的話移動群體牡蠣至低水溫水域養殖,此外,使用器具的管理,均為預防本病發生的方法。
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參考文獻: 1.Bachere E, Duramd JL, Tige G. Bonamia ostreae (Pichot et al,. 1979) parasite de I’huitre plate:comparaison de deux methods de diagnostic. Int. Exploit. Mer 1982;28:1-10.
2.Cavalier-Smith T. Protist phylogeny and th high-level classification of Protozoa. Europ. J. Protistol 2003;39:338-348.
3.Carnegie R.B, Cochennec-Laureau N. Microcell parasites of oysters:Recent insights and future trends. Aquat Living Resoruces. 2004;17:519-528.
4.OIE. Manual of Diagnostic Tests for Aquatic Animals. 2006;
Available at URL:http://www.oie.int/eng/nomes/fmanaul/A_00035.htm
5.Aquatic Animal Diseases Significant to Australis:Identification field guide. 2nd. 2004;
Available at URL:http://www.disease-watch.com/documents/CD/index/body.htm
6.Hine P.M. The ecology of Bonamia and decline of bivalve molluscs. N Z J. Ecol. 1996;20(1):109-116.
7.Yearsley GK, Last P.R, Ward RD. Australian Seafood Handbook:an identification guide to domestic species. CSIRO Marine Research, Australia. 1999;
Available at URL:http://www.disease-watch.com/documents/CD/index/htm/bib.htm
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