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牡蠣奴卡氏菌症
疾病代碼: DIS00073
建立日期: 2008/12/17
更新日期: 2009/09/01
作 者: 涂堅
中文病名: 牡蠣奴卡氏菌症
英文病名: Nocardiosis of oysters
疾病描述: 1.病原概述
病原型別:細菌
病原環境: 海水
學名:Nocardia crassostreae
病名(及俗名):
Nocardiosis, Fatal inflammatory bacteraemia (FIB), Focal necrosis, Multiple abscesses, Summer mortality, Pacific oyster nocardiosis (PON).
最早發現者:最早由Friedman等 (1987)分離本菌。
OIE狀況:未表列(Not listed)。
病原摘要:
本菌Nocardia crassostreae會引起太平洋牡蠣 Pacific oysters, Crassostrea gigas局部或全身疾病。本菌為好氣性生長、弱抗酸染色,、產生會分枝的不規則菌絲體; 肽聚醣 (peptidoglycan)含有meso-diaminopimelic acid ,利用arabinose 及 galactose 為主要醣源,46-58個碳原子組成的分枝菌酸、及G+C-rich 的核酸。依據部分165 rRNA gene序列分析,發現應該歸屬在 Nocardia otitidiscaviarum rRNA sub-group 下。本菌的標準株為NB4H (= ATCC 700418)。
人畜共通:非人畜共通傳染病
2.病原分類
病原分類:目前歸屬在放射菌科(actinomycetes),奴卡氏菌屬(Nocardia),豚鼠耳炎奴卡氏菌 Nocardia otitidiscaviarum rRNA sub-group 下。
別名:
命名沿革: 無

3.疾病特性:(感染組織及器官:感染路徑、好發組織器官、宿主)
全身器官均可生長。宿主為正牡蠣Crassostrea gigas 及歐洲牡蠣Ostrea edulis

臨床症狀及病理學:
可在感染牡蠣外套膜、、內收表面看到直徑1 cm大小黃綠色圓形膿疱。這種病灶也有可能是感染Mikrocytos mackini造成,但是奴卡氏菌造成的病灶較大。
組織病理學檢查
可在病灶處發現革蘭氏染色深染陽性,PAS染色陽性,分枝、顆粒狀嗜鹼性的的菌塊,病灶四周則被緊密聚集血淋細胞環繞。

疾病型態及流行病學:(急性或慢性型態、器官傳播、分佈情形)
全年均可發生感染,但是死亡通常發生在夏末及秋天。主要發生在北美西岸,由英屬哥倫比亞的喬治亞海峽(the Strait of Georgia, British Columbia)到加州。日本(Matsushima Bay , Japan)、荷蘭(Lake Grevelingen, the Netherlands)亦有病例發生。


病原致病性意義:(實際魚場及田間發病、抗藥性等情形)
實際現場死亡率並未詳細調查,在某些地區粗估約35%。Friedman 等. (1999)發現以Nocardia形成的heat shock proteins注射的牡蠣症狀類似實際發病牡蠣。另外發現實際感染Nocardia的牡蠣對熱的耐受性有所降低。
診斷方法: 一級初步診斷:臨床症狀觀察到牡蠣外套膜、鰓、內收肌、心臟表面看到直徑1 cm大小黃綠色的圓形膿皰。
二級初步診斷:在BHI培養基3-5 天即可長出分枝為不規則桿狀形態的菌絲體。菌落呈乾燥、臘狀、皺摺,沒有空中菌絲 (aerial hyphae) 出現。
組織壓片檢查
取膿皰處壓片,可見革蘭氏陽性、分枝、顆粒狀嗜鹼性的的細絲狀菌落

組織病理學
可在病灶處發現革蘭氏染色陽性深染,PAS染色陽性,分枝、顆粒狀嗜鹼性的的菌塊,病灶四周則被緊密聚集血淋細胞環繞。
三級初步診斷:無
一級確定診斷:無
二級確定診斷:無
三級確定診斷:PCR
Gee and Elston (1997)發表兩組 PCR引子供診斷用。第一組為利用16S rDNA 設計出能增幅所有的抗酸菌的引子,包含Nocardia。第二組引子則是依據第一組產物序列內設計出對Nocardia屬有特異性的巢內引子。另外由於Nocardia 三層細胞壁的關係,萃取DNA 時必須先以lysozyme處理才能順利萃取 DNA。
PCR引子序列:(增幅部份16S rDNA )
Forward: 5'-ACG TTG GAG GTT CGT CCT TCA G-3'
Reverse1 5'-TCA CCC CCT TGC TTC TCA TTG T-3'
Reverse2 5'-CCA GTC ATC ACC TTT TCT GTG GTC-3' The forward及 reverse 引子1增幅出 441 bp 片段, forwardand reverse 引子 2 增幅出 660 bp片段。
50 µl PCR反應液:10 mM Tris-HCl (pH 8.3), 50mM KCl, 1.5 mM MgCl, 200 mM deoxynucleotides, 0.5 mM 的前後引子, , 0.03 to 0.3 µg of template DNA。
PCR反應條件:先加熱上述反應液1分,再加入1.25 U Amplitaq DNA polymerase (Roche),然後進行35循環的增幅(30 s at 94°C, 30 s at 58°C and 1 min at 72°C)最後進行l 5 min at 72°C 的延長。產物定序及基因庫比對。
治療方法:
預防控制方法: 詳細討論疫苗發展現況及飼養管理控制現況The specific geographic
本病目前地理分佈位置並不明朗。與由於太平洋牡蠣在海中移動區域甚廣,因此似乎全球均有可能存在本病。防治之道,不可使用感染的牡蠣當為種苗。本病無法撲滅,但使用懸掛式遠離底部的飼養可降低本病的危害。另外在夏季將牡蠣由溫暖的淺灣移至較深處也可降低本病的侵害。
相關圖片:
Nocardiosis在內收肌(A)及體壁(B)的病灶
圖片參考來源:http://www.pac.dfo-mpo.gc.ca/sci/shelldis/images/nocaroy1.jpg
外套膜組織病理;Nocardia sp. (箭頭)被一群血林細胞圍在中央
圖片參考來源:http://www.pac.dfo-mpo.gc.ca/sci/shelldis/images/nocaroy2.jpg
小腸組織病理;Nocardia sp.被許多血淋細胞(A)包圍,另外許多血淋細胞 (B)正沿著上皮細胞移動(Gram stain)。
圖片參考來源:http://www.pac.dfo-mpo.gc.ca/sci/shelldis/images/nocaroy5.jpg
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